国产激情一区二区三区-色偷偷88888欧美精品久久久-小鸡庄园每日答案汇总-来一水AV@lysav

免費(fèi)咨詢熱線:
技術(shù)文章
首頁 > 技術(shù)中心 > PEI線性轉(zhuǎn)染試劑的使用可有什么要領(lǐng)

PEI線性轉(zhuǎn)染試劑的使用可有什么要領(lǐng)

 更新時(shí)間:2022-07-20 點(diǎn)擊量:1125
 
  PEI線性轉(zhuǎn)染試劑是由一種陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑,分子量40000,它能與核酸形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣泛適。該試劑可在含血清與抗生素的*培養(yǎng)基中發(fā)揮作用,即使在有血清存在的情況下,它仍然能高效的將核酸導(dǎo)入細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)操作簡單,對大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞都有較高的轉(zhuǎn)染效率(用于常見細(xì)胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等),并且細(xì)胞毒性較低。
  PEI線性轉(zhuǎn)染試劑的注意事項(xiàng):
  1、質(zhì)粒質(zhì)量:請務(wù)必使用高純度無內(nèi)毒素轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒。通過260nm光吸收測定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度。如有可能,請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性。
  2、細(xì)胞條件:使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保細(xì)胞沒有被細(xì)菌、真菌或支原體污染。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞,請?jiān)谵D(zhuǎn)染前至少傳代兩次。
  3、細(xì)胞培養(yǎng)液要求:PEI線性轉(zhuǎn)染試劑可用于有血清培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)染,并且轉(zhuǎn)染前不需要換培養(yǎng)基。但是制備轉(zhuǎn)染復(fù)合物時(shí)要求用無血清培養(yǎng)基稀釋DNA和轉(zhuǎn)染試劑,因?yàn)檠鍟绊憦?fù)合物的形成。確保細(xì)胞培養(yǎng)液沒有被細(xì)菌、真菌或支原體污染。轉(zhuǎn)染時(shí)培養(yǎng)液中不添加抗生素。
  4、DNA濃度和PEI轉(zhuǎn)染試劑量的優(yōu)化:DNA濃度和轉(zhuǎn)染試劑使用量受細(xì)胞類型及其他實(shí)驗(yàn)條件影響,初次使用應(yīng)優(yōu)化DNA濃度和轉(zhuǎn)染試劑量以得到大的轉(zhuǎn)染效率。使用者可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。DNA和轉(zhuǎn)染試劑的比例,通常推薦是1:2~1:5。
人人妻人人藻人人爽欧美一区| 成人免费视频在线观看| 国产免费无码一区二区视频| 国内精品卡一卡二卡三| 亚洲AV无码国产精品久久| 女人18毛片a级毛片免费视频| 国产二级一片内射视频播放| 亚洲日韩精品欧美一区二区| 国产精品ⅴ无码大片在线看| 免费A级毛片黄A片高清在线播放| 末成年娇小性色XXXXX| 最近2019中文字幕大全第二页 | 国产偷v国产偷v亚洲高清| 无码AV免费毛片一区二区| 帅小伙自慰VIDEOGAY男男 | 玩弄高耸白嫩的乳峰A片| 久久久久久久亚洲AV无码| 大肉大捧一进一出好爽视频| 亚洲国产精品久久久久久| 日本动漫在线| 亚洲字幕AV一区二区三区四区| 狠狠在啪线香蕉777视频| 乱码丰满人妻一二三区| 最近中文字幕高清中文字幕无| 国产亚洲精品久久久久久禁果TV | 亚洲爆乳无码精品AAA片蜜桃| H漫在线观看| 精品欧美А∨无码黑人| 国产精品污WWW一区二区三区| 婷婷综合另类小说色区| 无码人妻丰满熟妇区五十路百| 国产精品国色综合久久| 中文字幕被公侵犯的漂亮人妻| 日本老熟妇maturebbw| 麻豆亚洲AV成人无码久久精品| 国产又猛又黄又爽| 无码少妇一区二区三区| 国产精品国产三级国产AV主播| 国产美女被遭强高潮免费网站| 双性美人被调教到喷水A片| 97AV|