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PRECEDO乳腺癌3D類器官培養(yǎng)基

簡(jiǎn)要描述:北京百奧創(chuàng)新科技有限公司提供PRECEDO乳腺癌3D類器官培養(yǎng)基現(xiàn)貨,更多PRECEDO中科普瑞昇培養(yǎng)基的介紹,歡迎咨詢!

  • 產(chǎn)品型號(hào):型號(hào)齊全
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 更新時(shí)間:2024-12-25
  • 訪  問  量:1403
詳情介紹

產(chǎn)品名稱PRECEDO乳腺癌3D類器官培養(yǎng)基Breast Carcinoma Organoid Medium)
產(chǎn)品說(shuō)明PRECEDO乳腺癌3D類器官培養(yǎng)基Breast Carcinoma Organoid Medium)是一款促進(jìn)乳腺癌類器官體外形成和擴(kuò)增的培養(yǎng)基。該產(chǎn)品為無(wú)菌的液體混合系統(tǒng),含有維持目的細(xì)胞生長(zhǎng)所必需的氨基酸、維生素、有機(jī)和無(wú)機(jī)化合物和生長(zhǎng)因子等。該培養(yǎng)基的*配方可以提供一個(gè)合適的細(xì)胞所需營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,選擇性地促進(jìn)人乳腺癌類器官的體外生長(zhǎng)和擴(kuò)增。
PRECEDO乳腺癌3D類器官培養(yǎng)基
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
(1) 培養(yǎng)成功率高

PRECEDO乳腺癌3D類器官培養(yǎng)基

(2) 體外持續(xù)擴(kuò)增

PRECEDO乳腺癌3D類器官培養(yǎng)基

(3) 保持腫瘤特征

PRECEDO乳腺癌3D類器官培養(yǎng)基

(4) 藥敏結(jié)果與臨床數(shù)據(jù)接近

PRECEDO乳腺癌3D類器官培養(yǎng)基

使用說(shuō)明:
?實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1)提前將24孔細(xì)胞培養(yǎng)板置于37℃的培養(yǎng)箱中預(yù)熱過夜。
2)將15mL無(wú)菌離心管、1.5mLEP管、移液器、移液管、無(wú)菌槍頭等表面消毒后放入超凈工作臺(tái)中紫外照射30 min。
3)提前30 min從4 ℃冰箱取出乳腺癌類器官培養(yǎng)基平衡至室溫。

(4)提前從-20℃冰箱取出所需體積的細(xì)胞外基質(zhì)膠冰上融化。(5)配置含1%BSA的DMEM培養(yǎng)基冰上預(yù)冷備用。
?乳腺癌類器官培養(yǎng)
1)將取自乳腺癌患者的樣本進(jìn)行分離和消化,消化后的細(xì)胞懸液進(jìn)行計(jì)數(shù)。
2)按每孔1~2×10*個(gè)細(xì)胞密度計(jì)算所需細(xì)胞數(shù),根據(jù)計(jì)算好的體積吸取細(xì)胞懸液加入預(yù)冷的1.5mL離心管中,離心,棄上清,將細(xì)胞沉淀置于冰上。
3)按1∶2體積比,將一份體積的含1%BSA的DMEM加入2份體積的的細(xì)胞外基質(zhì)膠(Corning#356231)中,輕輕混勻(全程冰上操作),然后在冰上將配好的基質(zhì)膠混合液與細(xì)胞沉淀充分混勻。
4)將細(xì)胞沉淀與基質(zhì)膠的混合液按照35μL/孔滴在已提前預(yù)熱好的24孔板中央,使之形成圓頂狀膠滴。緩慢將細(xì)胞培養(yǎng)板移至培養(yǎng)箱至少30分鐘。
5)待基質(zhì)膠*凝固,沿24孔壁緩慢加入1mL/孔預(yù)先恢復(fù)至室溫的本類器官培養(yǎng)基,并將培養(yǎng)板置于37℃,5%CO2條件下靜置培養(yǎng)。
6)鏡下觀察類器官形成情況,每3~4天更換一次培養(yǎng)基。
?乳腺癌類器官收集
1)棄去培養(yǎng)基,用基質(zhì)膠解離試劑潤(rùn)洗槍頭后,每孔加入1mL該試劑,靜置1min。

2)用基質(zhì)膠解離試劑潤(rùn)洗槍頭后,吸取孔內(nèi)液體,輕輕吹打圓頂狀膠滴表面,將膠滴吹散,并將吹散后的含類器官的混合液收集至15 mL離心管中。
3)重復(fù)一次上述操作,將兩次洗脫下來(lái)的類器官合并收集于同一15mL離心管中。
4)37℃,75rpm水平搖床上解離10min(具體解離時(shí)間根據(jù)實(shí)際情況決定,以無(wú)明顯大塊膠狀物為準(zhǔn))。
5)10分鐘后在4℃下,300g,離心5min,小心吸棄上清,沉淀待用。
?乳腺癌類器官傳代
1)收集好的細(xì)胞沉淀(以無(wú)肉眼可見基質(zhì)膠狀沉淀為準(zhǔn))加入預(yù)冷的含1%BSA的DMEM培養(yǎng)基重懸,在4℃下,300g,離心5min。

2)小心吸棄上清,沉淀用含1%BSA的DMEM培養(yǎng)基重懸計(jì)數(shù)。
3)按照培養(yǎng)步驟操作,以大約1000個(gè)類器官/孔密度重新接種類器官,繼續(xù)擴(kuò)大培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
1.本產(chǎn)品在使用前需平衡至室溫。
2.使用產(chǎn)品時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,避免污染。
3.本產(chǎn)品中不含血清,含有抗生素,如無(wú)特別需要,不用額外添加血清和其他抗生素,可直接使用。
4.為保持本產(chǎn)品的理想使用效果,不宜將其過夜放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。5.請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用本產(chǎn)品,超出保質(zhì)期后,將無(wú)法達(dá)到理想的使用效果。
6.乳腺組織樣本建議為腫瘤術(shù)中樣本,且腫瘤細(xì)胞比例越高(至少>50%),培養(yǎng)成功率越高,不推薦用于少量樣本(如穿刺或循環(huán)腫瘤細(xì)胞)的培養(yǎng)。
7.本產(chǎn)品僅用于科研用途,不能用于體外診斷。

PRECEDO乳腺癌3D類器官培養(yǎng)基



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